Jerry M. wrote:

On Wed, 19 Jan 2005 22:15:17 +0900, Charles Plessy
<p-l-e-s-s-y-RemoveDashes@riken.jp> wrote:

Bonjour à tous,

je souhaite radiomarquer un ribo-oligonucléotide, avec pour
condition expresse qu'il ne soit phopsphorylé ni en 5' ni en 3'.

Je m'apprête donc à commander du 5'32P pCp, et le lier à
l'arrière de mon oligo avec l'ARN ligase du phage T4.

Pourquoi pCp? 

parce que je n'ai pas trouvé pAp, ou pApA, pardi !


 > Ca existe?

Oui

Combien ça coûte?

400 dollars environ (Amersham).

Ton oligo devrait donc être prêt à l'emploi, tu peux le marquer sans
problème avec du 5'32P-ATP et de la T4 polynucleotide kinase, comme
tout le monde, non?

Non, je veux le liguer en 5' d'un autre ARN. Donc, s'il est 5'P, il peut s'homodimériser ou se circulariser, et comme il a vocation à être en excès dans la solution...

Ma question est donc, connaissez-vous un autre substrat que
le pCp, genre pNpN, qui serait vendu par un quelconque fournisseur ?

Il me semble qu'on pouvait trouver ce genre de bizarreries chez
http://www.tebu-bio.com, mais je me demande si c'est bien ce dont tu
as besoin...

Je ne vois rien sur leur site. Peut-être avaient-ils un rôle d'importateur?

--
Charles